1968年岗崎利用了脉冲标记实验和脉冲追踪实验证明了冈崎片段的存在。脉冲标记实验:3HdT加入E.coli培养基中,30SEC杀死E.coli,提取DNA进行碱基分析。脉冲追踪实验是将E.coli放于3Hdt中30SEC后,它即转移到无放射性dt中数分钟,提取DNA进行碱基分析。实验结果表明:脉冲标记的片段大小为1000-2000个核苷酸.按半保留合成模式只应有一半新合成的DNA有岗奇片断。结果测得远大于这一半的量,似乎全是不连续的,也就是说,无法确两条链是否一条链连续复制,而另一条链不连续的。产生的原因是什么?以后的那些试验证明了DNA的复制是半保留复制的?
正确答案:原因是细胞内有低浓度的dUTP,DNA聚合酶对其分辨率不高,产生的脲嘧啶碱基会迅速的被脲嘧啶-N-糖苷酶切除,接着进行核苷酸切除修复,这是暂时导致在DNA上产生一个断裂。在DNA聚合酶I和DNAligase完成修复之前分离到的DNA片段是一段一段的。在尿嘧啶N-糖基化酶缺陷的大肠杆菌突变体中只有约一半的新合成的DNA是一段一段的原因是其缺失这种校正功能。
以下试验证明了DNA的复制是半保留复制的:密度梯度离心、放射自显影等试验。
以下试验证明了DNA的复制是半保留复制的:密度梯度离心、放射自显影等试验。
答案解析:有
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