一个十肽的氨基酸分析表明其水解液中存在下列产物: NH4+ Asp Glu Tyr Arg Met Pro Lys Ser Phe 并观察下列事实: (1)用羧肽酶A和B处理该十肽无效; (2)胰蛋白酶处理产生两个四肽和游离的Lys; (3)梭菌蛋白酶处理产生一个四肽和一个六肽; (4)溴化氢处理产生一个八肽和一个二肽,用单字母符号表示其序列为NP; (5)胰凝乳蛋白酶处理产生两个三肽和一个四肽,N-末端的胰凝乳蛋白酶水解肽段在中性pH时携带-1净电荷,在pH12时携带-3净电荷; (6)一轮Edman降解给出下面的PTH衍生物:写出该十肽的氨基酸序列。
正确答案:Ser-Glu-Tyr-Arg-Lys-Lys-Phe-Met-Asn-Pro
解:
(1)用羧肽酶A和B处理十肽无效说明该十肽C-末端残基为-Pro;
(2)胰蛋白酶专一断裂Lys或Arg残基的羧基参与形成的肽键,该十肽在胰蛋白酶处理后产生了两个四肽和有利的Lys,说明十肽中含Lys-…或-Arg-…-Lys-Lys-…或-Arg-Lys-…-Lys-…Arg-Lys-…四种可能的肽段,且水解位置在4与5、5与6或4与5、8与9、9与10之间;
(3)梭菌蛋白酶专一裂解Arg残基的羧基端肽键,处理该十肽后,产生一个四肽和一个六肽,则可知该十肽第四位为-Arg-;
(4)溴化氰只断裂由Met残基的羧基参加形成的肽键,处理该十肽后产生一个八肽和一个二肽,说明该十肽第八位或第二位为-Met-;用单字母表示二肽为NP,即-Asn-Pro-,故该十肽第八位为-Met-;
(5)胰凝乳蛋白酶断裂Phe、Trp和Tyr等疏水氨基酸残基的羧基端肽键,处理该十肽后,产生两个三肽和一个四肽,说明该十肽第三位、第六位或第七位为Trp或Phe;
(6)一轮Edman降解分析N-末端,根据其反应规律,可得N-末端氨基酸残疾结构式为:-NH-CH(-CH2OH)-C(=O)-,还原为-NH-CH(-CH2OH)-COOH-,可知此为Ser;
结合(1)、(2)、(3)、(4)、(5)、(6)可知该十肽的氨基酸序列为:
Ser-Glu-Tyr-Arg-Lys-Lys-Phe-Met-Asn-Pro
解:
(1)用羧肽酶A和B处理十肽无效说明该十肽C-末端残基为-Pro;
(2)胰蛋白酶专一断裂Lys或Arg残基的羧基参与形成的肽键,该十肽在胰蛋白酶处理后产生了两个四肽和有利的Lys,说明十肽中含Lys-…或-Arg-…-Lys-Lys-…或-Arg-Lys-…-Lys-…Arg-Lys-…四种可能的肽段,且水解位置在4与5、5与6或4与5、8与9、9与10之间;
(3)梭菌蛋白酶专一裂解Arg残基的羧基端肽键,处理该十肽后,产生一个四肽和一个六肽,则可知该十肽第四位为-Arg-;
(4)溴化氰只断裂由Met残基的羧基参加形成的肽键,处理该十肽后产生一个八肽和一个二肽,说明该十肽第八位或第二位为-Met-;用单字母表示二肽为NP,即-Asn-Pro-,故该十肽第八位为-Met-;
(5)胰凝乳蛋白酶断裂Phe、Trp和Tyr等疏水氨基酸残基的羧基端肽键,处理该十肽后,产生两个三肽和一个四肽,说明该十肽第三位、第六位或第七位为Trp或Phe;
(6)一轮Edman降解分析N-末端,根据其反应规律,可得N-末端氨基酸残疾结构式为:-NH-CH(-CH2OH)-C(=O)-,还原为-NH-CH(-CH2OH)-COOH-,可知此为Ser;
结合(1)、(2)、(3)、(4)、(5)、(6)可知该十肽的氨基酸序列为:
Ser-Glu-Tyr-Arg-Lys-Lys-Phe-Met-Asn-Pro
答案解析:有
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