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军队文职招聘考试

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举例说明植物细胞培养产酶的工艺流程。

正确答案:植物细胞培养产酶的工艺过程一般包括愈伤组织的诱导,细胞悬浮培养和酶的分离纯化三个阶级,现以大蒜细胞培养生产超氧化物歧化酶(SOD.为例,说明其工艺过程。
(1)愈伤组织的诱导:选取结实、饱满、无病虫害的大蒜蒜瓣,在4℃冰箱中放置3周,以打破休眠。去除外皮,先用70%乙醇消毒20秒,再用0.1%氯化汞消毒10min,成0.5cm3左右的小块,植入含有3mg/L2,4-D和1.2mg/L6-BA的半固体MS培养基中,25℃、600lux/12h/d光照的条件下培养18d,诱导得到愈伤组织,每18d继代一次。
(2)细胞悬浮培养:将上述在半固体MS培养基上培养18d的愈伤组织,在无菌条件下转入含有3mg/L2,4-D和1.2mg/L6-BA的液体MS培养基中,加入灭菌的玻璃珠,25℃、600lux、12h/d的光照条件下振荡培养10~12d,使愈伤组织分散成为小细胞团或单细胞。然后再无菌条件下,经过筛网将小细胞团或单细胞转入含有3mg/L2,4-D和1.2mg/L6-BA的液体MS培养基中,25℃、600lux、2h/d光照的条件下培养18d。
(3)酶的分离纯化:细胞培养完成后,收集细胞,经过细胞破碎,用pH7.8的磷酸缓冲液提取、有机溶剂沉淀等,分离得到超氧化物歧化酶。
答案解析:
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