有机溶剂沉淀(降低介电常数):
正确答案:利用酶等蛋白质在有机溶剂中的溶解度不同而使之分离的方法。
1.淀机理:降低溶液的介电常数;引起蛋白质脱水
2.用有机溶剂:丙酮乙醇甲醇,用量一般为酶液体积的2倍左右,终浓度为70%。
3.点:
优点:
①分辨率比盐析法高
②沉淀不需脱盐
③溶剂易蒸发,沉淀易离心。
缺点:
①容易引起蛋白质变性失活
②有机溶剂易燃、易爆,对安全要求较高。
4.响有机溶剂沉淀的因素
①温度:低温(0℃)操作。
②pH值:尽可能靠近其等电点。
③离子强度:采用<0.05mol/L的稀盐溶液,增加蛋白质在有机溶剂中的溶解度,目的:防止蛋白质变性
④蛋白质浓度:适当,一般为5〜20mg/ml
1.淀机理:降低溶液的介电常数;引起蛋白质脱水
2.用有机溶剂:丙酮乙醇甲醇,用量一般为酶液体积的2倍左右,终浓度为70%。
3.点:
优点:
①分辨率比盐析法高
②沉淀不需脱盐
③溶剂易蒸发,沉淀易离心。
缺点:
①容易引起蛋白质变性失活
②有机溶剂易燃、易爆,对安全要求较高。
4.响有机溶剂沉淀的因素
①温度:低温(0℃)操作。
②pH值:尽可能靠近其等电点。
③离子强度:采用<0.05mol/L的稀盐溶液,增加蛋白质在有机溶剂中的溶解度,目的:防止蛋白质变性
④蛋白质浓度:适当,一般为5〜20mg/ml
答案解析:有
![](/editor/images/201705/qrcode_for_gh_573e2a458573_258.jpg)
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