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军队文职招聘考试

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概述基因定点诱变的常用方法。

正确答案:目前常用的定位诱变方法主要有:
(1)酶切诱变:先选择合适的限制酶将基因切开,然后插入或删除有关序列,可以在切点处改造基因序列。
(2)寡核苷酸指导的诱变:a.制备单链DNA模板;b.合成诱变寡核苷酸;c.寡核苷酸与模板退火并合成异源双链DNA;d.将异源双链DNA插入合适的载体;e.转染宿主细胞;f.筛选和鉴定突变体。
(3)PCR诱变:在引物中引入非配对碱基,通过PCR引物可以在扩增产物中引入点突变,嵌套式PCR还可以在基因内部或在一次PCR中同时在多处引入变异。各种变异,包括插入、删除、置换和重组,都可用PCR的方法来进行。
答案解析:
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