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医学高级专业技术资格答辩

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用PCR可检测沙门氏菌,试述模板的制备,即沙门氏菌DNA的提取。

正确答案:1.单纯离心法:标本经多次慢、快速交替离心,收集沉淀物,加热裂解,提取DNA。
2.化学提取法:先用表面活性剂加蛋白酶K处理样本,再用酚-氯仿-异戊醇抽取,最后以无水乙醇沉淀DNA。
3.磁免疫分离法:先制备沙门氏菌的鼠单克隆抗体(McAb)包被磁性小珠,与样本在室温下孵育,使McAb与沙门氏菌特异性结合,再用磁性将磁珠吸取出来,经无菌蒸馏水洗涤后,用沸水裂解提取DNA。
4.增菌法:将样本用增菌肉汤在37℃孵育适当时间后离心,再煮沸裂解,提取DNA。
答案解析:
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