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生物学

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什么是蛋白质组学?简述二维电泳(2-DE)和质谱(MS)技术在蛋白质组学研究中的应用。

正确答案: 蛋白质组学(Proteomics):指在大规模水平上研究蛋白质的特征,包括蛋白质表达水平,翻译后修饰,蛋白与蛋白相互作用等,由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生,细胞代谢等过程的整体而全面的认识。
目前蛋白质组学研究在表达蛋白质组学方面研究的最为广泛,其分析通常有三个步骤:第一步、运用2-DE技术分离样品中的蛋白质;第二步、应用质谱技术或N末端测序鉴定2-DE分离的蛋白质;第三步、应用生物信息学技术存储、处理、比较获得的数据。
(1)2-DE(Two-dimensional gel electrophoresis,双相凝胶电泳)
2-DE在1975年出现,是一项广泛应用于分离细胞、组织、或其他生物样品中蛋白质混合物的技术。它根据蛋白质不同的特点分两相分离蛋白质。第一相是等电聚焦(IEF.电泳,根据蛋白质等电点的不同进行分离。
第二相是SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE.,根据蛋白质的分子量不同进行分离。经过2-DE以后,二维平面上每一个点一般代表了一种蛋白,这样成千种不同的蛋白即可被分离,有关蛋白质的等电点、分子量及每种蛋白的数量信息也可以得到。
(2)MS(MassSpectrometry,质谱)
对2-DE所产生的上千个蛋白用传统的方法如Edman降解法等进行分析将是一个很艰巨的任务。质谱技术的发展解决了这一难题。它需要三个步骤,首先通过离子化装置将分子转化为气态离子,接着通过质谱分析器按照质荷比(m/z)的不同进行分离,最后转化到离子检测装置。
答案解析:
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