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100907生物制药专业

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试述核小体的结构要点及其实验证据

正确答案:结构要点:
1、每个核小体单位包括200bp左右的DNA超螺旋和一个组蛋白八聚体以及一个分子的组蛋白H1。
2、组蛋白八聚体构成核小体的盘状核心颗粒,相对分子质量100x103,由4个异二聚体组成,包括两个H2A-H2B和两个H3-H4。
3、146bp的DNA分子超螺旋盘绕组蛋白八聚体1.75圈。组蛋白H1在核心颗粒外结合额外20bpDNA,锁住核小体DNA的进出端,起稳定核小体的作用。
4、两个相邻核小体之间以连接DNA相连,典型长度为60bp,不同物种变化值为0~80bp不等。
5、组蛋白与DNA之间的相互作用主要是结构性的,基本不依赖于核苷酸的特异序列
6、核小体沿DNA的定位受不同因素的影响。
实验证据:
1、用温和的方法裂解细胞核,将染色质铺展在电镜铜网上,通过电镜观察,未经处理的染色质自然结构为30nm的纤丝,经盐溶液处理后解聚的染色质呈现一系列核小体彼此连接的串珠状结构,串珠的直径为10nm。
2、用非特异性微球菌核酸酶消化染色质时,经过蔗糖梯度离心及琼脂糖凝胶电泳分析,发现绝大多数DNA被降解成大约200bp的片段;如果部分酶解,则得到的片段是以200bp为单位的单体、二体、三体等。
3、应用X射线衍射、中子散射和电镜三维重建技术,研究染色质结晶颗粒,发现核小体颗粒是直径为11nm、高6nm的扁圆柱体,具有二分对称性。
4、SV40微小染色体分析。
答案解析:
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