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化学工程

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一种蛋白质的混合物在pH6的DEAE-纤维素柱中被分离,用pH6稀盐缓冲液可以洗脱C,用pH6的高盐缓冲液,B和A依次被洗脱,用凝胶过滤测定得A的Mr 是240000,B的Mr是120000,C的Mr是60000。但SDS-PAGE只发现一条带。请分析实验结果。

正确答案:DEAE-纤维素柱层析的结果说明,在pH6的条件下,A带有较多的负电荷,B次之,C带负电荷最少。凝胶过滤法测出A的Mr是C的4倍,B的Mr是C的2倍,但SDS-PAGE只发现一条带。由于SDS-PAGE测定的亚基的Mr,凝胶过滤法可以测定寡聚体的Mr,可以推断C是单体,B是以C为亚基的二聚体,A是以C 为亚基的4聚体,由于C在pH6时带负电荷,随着亚基数的增加,带负电荷的量也会增加,这与DEAE-纤维素层析的结果也是一致的。
答案解析:
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