为什么相同相对分子质量的线状DNA比共价闭合的环状DNA能结合更多的溴乙锭?如何利用这一点在氯化铯梯度中分离这两种DNA?为什么共价闭环DNA在含溴乙锭的介质中的沉降速度随溴乙锭的浓度增加出现近似U形的变化?
正确答案:溴乙锭插入碱基对之间,共价闭合的DNA比线状双链DNA结构紧密,溴乙锭插入的可能性较少。制备溴乙锭氯化铯梯度,环状DNA插入溴乙锭较少,沉降较快,可以将两者分开。DNA-溴乙锭复合物用异戊醇提取,DNA很容易与溴乙锭分开。超螺旋DNA沉降快,开环和线形DNA沉降慢。共价闭环DNA形成负超螺旋,具有较快的沉降速度。少量溴乙锭插入DNA的碱基对之间,减少负超螺旋密度,使沉降速度减慢,但是大量溴乙锭可以引入正超螺旋,使沉降加快。因此随溴乙锭浓度增加,共价闭环DNA的沉降速度出现近似U形变化。
答案解析:有
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