何谓Km?试比较V-[S]作图法和双倒数作图法求Km的原理及优缺点。
正确答案:⑴V-[S]作图法
以底物浓度为横坐标,反应速度为纵坐标作图,求出最大反应速度。根据Km的定义,最大反应速度一半时所对应的底物浓度即为Km。由于反应速度只能接近Vmax,而永远达不到最大速度,所以最大速度的一半不易求得,用该法求得的Km不太准确。
⑵双倒数作图法
该法是将米氏方程转化为倒数方程:
1/V=Km/Vmax*[S]+1/Vmax
以1/[S]为横坐标,以l/V为纵坐标作图,所得直线在纵坐标上的截距代表最大反应速度的倒数(l/Vmax),而在横坐标上的截距代表一l/Km。由于代表底物浓度低的点往往偏离直线较远,因而影响了Km和Vmax的精确测定。尽管这些方法有一定的缺点,但仍作为目前实验室较常用的方法。
以底物浓度为横坐标,反应速度为纵坐标作图,求出最大反应速度。根据Km的定义,最大反应速度一半时所对应的底物浓度即为Km。由于反应速度只能接近Vmax,而永远达不到最大速度,所以最大速度的一半不易求得,用该法求得的Km不太准确。
⑵双倒数作图法
该法是将米氏方程转化为倒数方程:
1/V=Km/Vmax*[S]+1/Vmax
以1/[S]为横坐标,以l/V为纵坐标作图,所得直线在纵坐标上的截距代表最大反应速度的倒数(l/Vmax),而在横坐标上的截距代表一l/Km。由于代表底物浓度低的点往往偏离直线较远,因而影响了Km和Vmax的精确测定。尽管这些方法有一定的缺点,但仍作为目前实验室较常用的方法。
答案解析:有
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