酵母的克隆载体有哪几种,它们的基本特点是什么?
正确答案:
酵母菌载体 (Yeast vector) 依其能否独立复制可分为结合载体和复制载体。它们的基本特点是: 结合载体(Integrating vector):载体没有复制序列,必须嵌入酵母菌的染色体内才能随着细胞分裂时分裂。一般用作制备基因文库用。 复制载体(Replicating vector):载体有与复制相关的序列,依其复制序列种类可分为:
(1) 2 μ 质粒:从酵母菌天然的质粒上截取一段包含复制序列的 2μ DNA。 其优点是非常稳定,可确保细胞分裂时,质粒的性状可移交到子代中不遗失。
(2)ARS 质粒:从酵母菌的染色体中截取一段ARS 片段。ARS是表示Autonomously replicatingsequence。ARS 质粒的稳定性较差,质体常被分解而无法代代相传。但是若加入一段着丝粒序列(centromere sequence ),变成CEN 质粒,就可使质粒稳定性提高,但CEN 质粒的拷贝数较低,一般为单拷贝。
(3)酵母人工染色体(YAC ,yeast artificial chromosome),这种载体除了上述ARS, CEN序列外,两端再加上端粒序列,形成彷彿就是染色体般的外观,故名之。 其特性是容量 (capacity) 超大,可承载 0.2 - 2.0 Mb DNA的长度。多被用于构建基因组文库用。
(1) 2 μ 质粒:从酵母菌天然的质粒上截取一段包含复制序列的 2μ DNA。 其优点是非常稳定,可确保细胞分裂时,质粒的性状可移交到子代中不遗失。
(2)ARS 质粒:从酵母菌的染色体中截取一段ARS 片段。ARS是表示Autonomously replicatingsequence。ARS 质粒的稳定性较差,质体常被分解而无法代代相传。但是若加入一段着丝粒序列(centromere sequence ),变成CEN 质粒,就可使质粒稳定性提高,但CEN 质粒的拷贝数较低,一般为单拷贝。
(3)酵母人工染色体(YAC ,yeast artificial chromosome),这种载体除了上述ARS, CEN序列外,两端再加上端粒序列,形成彷彿就是染色体般的外观,故名之。 其特性是容量 (capacity) 超大,可承载 0.2 - 2.0 Mb DNA的长度。多被用于构建基因组文库用。
答案解析:有
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