简述用细胞培养进行流感病毒分离培养的操作步骤。
正确答案:
1)细胞传代:细胞按常规方法消化后,稀释,分装T25小瓶,37℃温箱培养。
2)标本接种:长成单层的细胞瓶,倒掉营养液,用Hank,s洗3遍,每瓶接种标本1ml,34℃吸附1小时,加入维持液(含胰酶、不含小牛血清)6ml,每份标本接种2瓶,同时做正常细胞对照。
3)标本培养:接种标本的细胞瓶,放34℃培养7天,隔日镜下观察一次。
4)标本收获:细胞颗粒增多,变圆,最后脱落,也可呈网状。出现细胞病变者用豚鼠血球进行血凝素测定,细胞病变明显时收获,无病变及血凝阴性的标本盲传,仍为阴性时报告阴性。
2)标本接种:长成单层的细胞瓶,倒掉营养液,用Hank,s洗3遍,每瓶接种标本1ml,34℃吸附1小时,加入维持液(含胰酶、不含小牛血清)6ml,每份标本接种2瓶,同时做正常细胞对照。
3)标本培养:接种标本的细胞瓶,放34℃培养7天,隔日镜下观察一次。
4)标本收获:细胞颗粒增多,变圆,最后脱落,也可呈网状。出现细胞病变者用豚鼠血球进行血凝素测定,细胞病变明显时收获,无病变及血凝阴性的标本盲传,仍为阴性时报告阴性。
答案解析:有
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