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自然科学相关工程与技术

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基因工程的操作过程的主要步骤包括哪些?

正确答案: 切、接、转、增、筛(检)

(1)切——获得DNA片段,取得目的基因;载体的选择与制备。
方法:从生物基因组中分离得到——基因组DNA——>酶切产物
从总RNA中分离得到mRNA,再逆转录得到cDNA
人工合成——化学合成;PCR(聚合酶链式反应)
(2)接——DNA片段和载体DNA在体外连接,形成重组子。
(3)转——将重组的DNA引入宿主细胞
方式:转化——某一基因型细胞从周围介质中吸收另一基因型细胞的DNA,而使其基因型和表型发生相应变化的现象;转染——除去蛋白质外壳的病毒核酸感染细胞或原生质体的过程;转导——用噬菌体做载体,将一个细胞的基因传递给另一个细胞的过程。还有显微注射等。
(4)增——培养已转化细胞,使目的基因在其中进行复制、扩增,并将其整合到受体细胞的基因组中。
(5)筛、检——重组子的筛选与鉴定。筛选和鉴定转化细胞,获得使外源基因高效表达的基因工程菌或细胞。
答案解析:
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