简述间接免疫荧光法(IFA)检测人血清出血热IgG抗体的具体操作步骤。
正确答案:
1)用pH7.4,0.02mol/LPBS稀释待检血清,从1:20开始做2倍或4倍连续稀释至需要的稀释度;
2)取出抗原片,用蒸馏水漂洗后,冷风吹干;
3)用加样器依次从高稀释度到低稀释度逐个加入已稀释的待检血清,加入量以覆盖细胞抗原面为准(若为双份血清,最好上排为急性期血清,下排为恢复期血清),在37℃水浴箱湿盒孵育30~40分钟(每次试验同时设阳、阴性对照);
4)用PBS震荡洗涤3次,每次5分钟,再用蒸馏水洗涤1次脱盐,冷风吹干;
5)用含1:3万的伊文思兰PBS按工作浓度稀释荧光结合物,滴加各孔(以覆盖细胞抗原面为准),在37℃水浴箱湿盒孵育30分钟;
6)同4)洗涤、漂洗、吹干;
7)荧光显微镜观察结果。
2)取出抗原片,用蒸馏水漂洗后,冷风吹干;
3)用加样器依次从高稀释度到低稀释度逐个加入已稀释的待检血清,加入量以覆盖细胞抗原面为准(若为双份血清,最好上排为急性期血清,下排为恢复期血清),在37℃水浴箱湿盒孵育30~40分钟(每次试验同时设阳、阴性对照);
4)用PBS震荡洗涤3次,每次5分钟,再用蒸馏水洗涤1次脱盐,冷风吹干;
5)用含1:3万的伊文思兰PBS按工作浓度稀释荧光结合物,滴加各孔(以覆盖细胞抗原面为准),在37℃水浴箱湿盒孵育30分钟;
6)同4)洗涤、漂洗、吹干;
7)荧光显微镜观察结果。
答案解析:有

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